9年3个月前修改于 9年3个月前IP:广东
838919
24楼
基因相关的实验首先要会的是pcr实验。而pcr实验的前提是核酸提取功夫和技术要过关。提取DNA和RNA这两种实验要有扎实的操作基础才行。分子生物学实验最坑爹的是要想便宜就要花好大的力气和时间去做。提取这两种核酸成本最低的都离不开冷冻高速离心机。我们实验天天都在做PCR和RT-PCR,通过标准化的操作规程提取RNA要2个小时。DNA加上裂解至少也要2个小时。如果是难以裂解的就要过夜裂解。PCR实验要是没有PCR仪器业余的就准备好至少3口不同温度的水域锅。要按照程序30秒换一个温度。这样重复个30个循环要记住。RNA相关的实验就不能马虎,RNA极其容易降解。不是引物RNA不稳定,而是自然界的生物会不断产生RNA酶向外排放。而且RNA酶高温灭菌不会失去活性。这就是难度。RNA实验要大量使用有毒的RNA酶抑制剂和蛋白变性剂。PCR试剂很便宜现在基本可以控制在1个孔2块钱以内。RT-PCR试剂就很贵十倍与PCR试剂的成本。而且PCR操作或者提取核酸都是以微升为单位计算的,移液器是少不了的。对还有要看PCR结果还需要琼脂糖凝胶电泳这种最基础的手段。其他高大上的就不说了。
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我也是有底线的