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记一次细胞的原代培养
2023/01/05
IP:河南
关键词:细胞原代培养

        之前在学校实验课上做过乳鼠肾成纤维细胞的原代培养,现将实验流程总结出来以记录、分享。由于操作大部分在超净工作台上不便记录,故照片较少且截剪后较模糊。

     (1)取材切割:将乳鼠肾脏置于PBS液后去除被膜,无菌PBS冲洗三次后剪成小块,再次用PBS液冲洗至组织发白去上清液,而后转移至离心管。

     (2)消化:离心管中加入1mL0.25%胰蛋白酶,37℃消化20min,期间注意震荡。消化后静置去上清液。

     (3)接种:取3mL含小牛血清的1640培养液,在离心管中混悬后加入培养瓶。 Screenshot_20230105_165229_edit_441710591086447.jpg a97763e7d1e00e2_edit_441738993651541.jpg

      (4)培养:37℃培养三天(由于疫情实际上培养了5天)

Screenshot_20230105_163906_edit_440965405853554.jpg

     (5)观察:使用倒置显微镜观察细胞

Screenshot_20230105_163811_edit_440944814026323.jpg Screenshot_20230105_163802_edit_441040437883995.jpg

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