之前說過會拍的~星期三的微生物化驗~(多圖)(完成了)
HOHOLO 2009-4-10农业
驗牛奶內的需氧常溫細菌總數目~

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實驗室外面~ (看到"生化危機BIOHAZARD"的標誌嗎?難道會有喪屍?)
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虛驚一場,沒有喪屍~實驗室內的桌案子

這麼早不會有人插隊吧?
+200  科创币    虎哥   2009-04-10   
+100  科创币    花心大萝卜   2009-04-10   
来自 农业
 
2009-4-10 08:39:05
HOHOLO(作者)
1楼
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放藥品的架子, 大部分都是營養液或是培養基的粉劑(買回來就配好成份的)
可是大部分都過期了~2005年的都還有~
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其中一種常用的PDA, 馬鈴薯糊精培養基, 加點酒石酸之後用來種酵母或者真菌的~
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HOHOLO(作者)
2楼
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這2個都是我們今次用的標準數目培養基(SPCA)
2間不同公司的出品,上面的是小粒劑,很難煮溶的,不過不容易煮糊~
下面是粉劑,很易溶也很易糊
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HOHOLO(作者)
3楼
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稀釋樣品用的生理鹽粉劑及丸劑~
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HOHOLO(作者)
4楼
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這個是丸劑的樣子~一粒溶於500ml 蒸餾水就是標準生理鹽液了~
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這個機器強大~高壓蒸氣消毒鍋~ 用來消毒所有東西的
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HOHOLO(作者)
5楼
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爐子控制板~ 按鍵選溫度, 常用的是121,105 和132 攝氏~

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這支是什麼? 不能吃的果凍~HAHA 就是標準數目培養基(SPCA) 完成的樣子~
上星期我們準備好的了, 把粉劑開水煮溶之後拿去121度消毒了半分鐘,之後放了在4度冷房儲存~
現在拿出來再用105度蒸溶待用~
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HOHOLO(作者)
6楼
要出去做街訪~
回來再上~還有40多張....天啊~
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2009-4-11 20:43:49
2009-4-11 20:43:49
HOHOLO(作者)
7楼
我不太清楚醫院內的消毒方法, 刀具等應該不會用高壓蒸氣消毒~因為會鏽~
從前在公司或是實驗室中看到過有乾式的高溫消毒爐,不過沒用過~不會說~還望樓上的朋友也可以為大家介紹一下 [s:251]
實驗下面幾張就來了~
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裝滿了一籃子的待用培養基(未熔的)
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因為蒸汽消毒..冷凝之後有很多水點的~要放在這個內做乾燥~也就是乾燥烤箱了,保溫在50度左右~為防培養基重新凝固~(剛剛開機,溫度仍在23度[s:7])
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HOHOLO(作者)
8楼
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用於純菌種暫時儲存的冰箱~(傳說中的T VIRUS 和G VIRUS[s:247],下面那張,很大的一個"生化危機"標誌~ )
長期儲的不在這個房間,也很小用~用甘油泡著在液氮中冷藏~下次試試拍~
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HOHOLO(作者)
9楼
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這個是incubator~ 中文是不是叫恆溫箱? 這東西一年365.25日24小時都開的~ 37度是常溫細菌用的~
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HOHOLO(作者)
10楼
18671

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二級生物防護的保護櫥~獨立過濾抽風的。。咱們很不常用~
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HOHOLO(作者)
11楼
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必須帶護目鏡的警示!不帶的會被人轟出去(其實是保護自己,角膜是沒有皮膚保護的~)
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實驗開始了~ 預備工夫~ 把膠的用完即棄培養皿(出廠時已消毒了)編上編號~
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HOHOLO(作者)
12楼
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用完即棄培養皿~牌子叫STERILIN~很出名+很常用的~7毛一隻, 一袋有12隻~已消毒的~打開袋子那一刻開始就要做無菌操作~
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用一品牌的已消毒膠移液管~此為0.1-1ml定量的~
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HOHOLO(作者)
13楼
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一大堆移液管~一支只可以用一次~我們當天有20個樣品,每個要用2支
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其他用具(左起):已消毒稀釋用生理鹽液,用70%酒精浸著的鑷子和剪刀,消毒用的70%酒精噴霧~
前面的是移液管泵,相信大家都見過了~
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HOHOLO(作者)
14楼
18687

  18688

一大堆的稀釋用生理鹽液,和一大埋的10ML移液管(已消毒的)
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HOHOLO(作者)
15楼
做所有實驗都一樣~準備的時間比真正做的時間還要多很多,不過這才是正常的~
18689
  
不用介紹了~寫得很清楚,用來消毒用完的移液管用~
18690

真正開始做了~ 脫衣服~打開移液管的消毒包裝~把一條條的插進洞入面.... [s:252]
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HOHOLO(作者)
16楼
以下來是一個微生物學常用的技巧: serial dilution, 連續稀釋?是這樣翻譯的嗎?
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白色的是由25ml原本的樣品(牛奶,10的0次),移入225ml的稀釋用生理鹽液,10的-1次稀釋液
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提取了1ml 的10的-1次稀釋液,放入一隻已消毒的培養皿~
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HOHOLO(作者)
17楼
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試管入面是9ml的稀釋生理鹽液~(一個不太熟手的同學做的,錯誤示範,不應該倒持移液管)
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把1ml 的10 -1次移入9ml 的稀釋生理鹽液,做出10 -2次的稀釋~
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HOHOLO(作者)
18楼
18705

用均質機(Vortex)搖一下~
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移1ml 放 之後 0.1ml (10 -3次)

一般是做到-5的~不過牛奶是很清潔的東西~ -3已經有餘了~
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HOHOLO(作者)
19楼
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另一個角度拍~
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HOHOLO(作者)
20楼
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-1 的稀釋液~很白[s:7]
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記得一開始我們用105度~把培養基熔了嗎? 熔了就是這樣子的了~晶瑩剔透,現在要拿出來用了~
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HOHOLO(作者)
21楼
之後是另一個技巧: 倒碟 (POUR PLATE METHODE)
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左邊的是之後做好的培養皿, 準備把培養基倒入去
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倒了~用培養基均勻地混合樣品的稀釋液,有菌的話,因為被基質固著了~2日後就會形成菌群落(COLONY)
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HOHOLO(作者)
22楼
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把基質平均的分佈在培養皿上~
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HOHOLO(作者)
23楼
18715

18716

如此類推~倒完全部的~
放著等凝固~
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HOHOLO(作者)
24楼
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另一個很重要的技巧~"反碟",也就是凝固後把培養皿全部倒轉過來,底向上, 為防止蓋子上的冷凝水點倒流在基質上影響細菌生長~
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我們做了3個小時的成果
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HOHOLO(作者)
25楼
18719

當然不止上面的這麼少~ 另一半~
18720

放進恆溫器中~
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HOHOLO(作者)
26楼
18721

我學校實驗室中放危險品櫃門貼著的清單[s:7]
早2天有個小白把這個當硫酸鈉開溶液之後走去水溶加熱了~
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HOHOLO(作者)
27楼
終於發完了~
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2009-4-15 21:15:45
2009-4-15 21:15:45
28楼
serial dilution应该系梯度稀释
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2009-4-16 18:43:50
HOHOLO(作者)
29楼
引用第33楼spdyjjz于2009-04-15 21:15发表的  :
serial dilution应该系梯度稀释

謝謝前輩~我文法不通,詞難達意!多謝指正~
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HOHOLO(作者)
30楼
原本這次的化驗結果昨天已經看了~
本應拍兩張相片給看看~不過昨天太忙..抽不到時間~
但是明天就會有昨天做的結果了!到時再拍!

20個牛奶樣品,平均嗜氧常溫總菌數目最多不多於50CFU/ml, 以本地預先包裝食品的含菌量指引來說(法例指引為小於1000CFU/ml), 可以說是十分十分乾淨! (參考值:一個經嚴格監控生產出來的面包,同類測試結果為500CFU/g 左右)

3/4的UHT 牛奶含菌量少於或等於10CFU/ml, 也就是在-1的培養基上只有一個群落或者什至一個都沒有~

個別UHT品牌含大約35CFU/ml , 不過基於含菌量太低, 培養基上的群落小於25個CFU, 這只是EST.35, 也就是最合理估算值, 不代表真正數值,真正數值很有可能低很多(因細菌數目太少,相對的誤差就變得很大了)!

巴士德消毒的牛奶 含菌量由EST.5-EST.25左右~也是十分清潔~比想像中更清潔!

昨天做的化驗新增了腸道菌數目測試~結果明天也可以看了~
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2010-9-24 23:18:52
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31楼
我们叫那为 倍比稀释
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