叶绿素的提取和分离——半成功
这个我真的不知道发哪里去。所以。。。。就发这里来了。如果发错版块了,那就不好意思了啊
离开了实验室很久,去倒腾高压板块了。昨天想了一下,在学校做的这个实验居然没成功,实在没办法。于是乎重新做过了。
器材:碾钵、烧杯、滤纸、一次性注射器针头(针头磨平,代替毛细管)
药品:无水乙醇(说实话应该用75%酒精代替)、93#汽油(这是可以代替石油醚的)
过程:1。菜叶(喂猪那种,应该有人见过)放在碾钵里碾成糊状,同时加入无水乙醇萃取叶绿素
      2。用棉花过滤出叶绿素的乙醇溶液
      3。用一次性针头吸取滤液在滤纸上画线
      4。放入93#汽油中层析
结果:由于使用的是酒精,所以画出的线在滤纸上扩散的比较大,弄得最后层析的时候出现了“致命”的后果。同时用一次性针头代替也是不太好做的。从上到下依次为:胡萝卜素,叶黄素,叶绿素a,叶绿色b
PS:先发文字。等下传图片。不然会卡死
+1  学术分    科创论坛   2011-02-09   兑为学术分。
+400  科创币    科创论坛   2011-02-09   介绍了纸色谱法的基本操作。希望就层析的原理再深入一点。
-5000  科创币    科创论坛   2011-02-09   兑换学术分。
+200  科创币    delete   2011-02-09   累计加分不宜过多 做的非常好 rf点也能非常清晰的算出来 继续鼓励
来自:化学化工 / 化学与化工
2011-2-9 14:13:12
奇侠(作者)
1楼
好啦。。。图片来了
提取出来的叶绿素溶液,颜色很深
叶绿素溶液.png
划线用的针头
划线用的针头.png   
滤纸+画线
滤纸.png   
第一张层析
第一张层析.png
第二张层析
第二张层析.png
THE END
PS:剩下的我下午再发上来
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2011-2-9 14:40:21
奇侠(作者)
2楼
纸谱分析法似乎不太好说。我把我那几本书上的一些内容拍成图片压缩了。想传上来。。。忽然发现不懂传。who can tell me?
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3楼
书上说,用CaCO3和二氧化硅一起磨效果会比较好……
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4楼
没记错的话高中课本应该用的是丙酮吧
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奇侠(作者)
5楼
回 3楼(noname剑人) 的帖子
书上是说:碳酸钙是保护叶绿素不被破坏,而二氧化硅则是为了使研磨更加充分。
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奇侠(作者)
6楼
回 4楼(murmur) 的帖子
原实验就是用丙酮的,但是考虑到丙酮是具有一定毒性的。所以就用乙醇代替,但是这个方面我出了一点差错,用到了分析纯的乙醇。无水乙醇让细胞膜凝固,色素出不来了。尽量用75%酒精。
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2011-02-10 08:53:41
7楼
如果用丙酮的话,要用多少的?
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8楼
引用第7楼123123123于2011-02-10 08:53发表的 :
如果用丙酮的话,要用多少的?  

这个可以参考高中生物课本 我记得高考叶绿素提取属于必考内容

当然了 实验室有通风橱的 这点丙酮还不至于咋地
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9楼
扩散厉害,有啥方法让扩散更小?
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2011-02-15 12:20:33
2011-2-15 12:20:33
10楼
现在课本是用乙醇提取了,安全与环保(貌似有互相包含)……
无水乙醇似乎没什么问题,因为要研磨,再一个细胞膜主要是脂质,不像细菌细胞壁是肽聚糖容易变形……加些二氧化硅研磨效果会好些吧……

这个色带保存不久的,胡萝卜素会最先褪色,然后叶黄素……以前保留过一段时间,叶绿素最后褪色……

扩散试试不同的载体和层析液……
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2011-06-14 12:51:08
2011-6-14 12:51:08
11楼
使用30克菠菜叶研成糊,装入滤纸包,使用80毫升丙酮,在索氏提取器中提取,3个小时后,菠菜糊将成为白色纤维,同时,叶绿素们凝聚成墨绿色的脂状物粘在器壁上。倒出丙酮溶液(其中还有叶绿素),使用30毫升环己烷收集墨绿色脂状物,就可以进行层析,浓缩后可进行柱色谱。
我正在要进行柱色谱。[s:333]
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12楼
此外,10楼说得很对的,我的层板本来有5条带,30分钟后只剩下4条带。
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13楼
687_9b00130805468929f2795503516eb.jpg
687_5e7c130805463087068d2f153a349.jpg
687_1135130805453769f099a70adeef8.jpg

那个绿色的液体是用氯化钠溶液洗涤叶绿素的环已烷深墨绿色溶液得到的,粘粘巴巴的,像是甘油脂皂化的样子,估计是细胞膜以及其它的一些脂质细胞器搞的
褐色的是菠菜的丙酮萃取液脱丙酮以及用环已烷提萃后得到的
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