手把手教你DIY小动物透明骨骼染色标本!
本帖最后由 zxyso4 于 2014-6-7 01:50 编辑

也许有人已经看到过了网上的日本生物学家制作透明染色标本
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透明骨骼标本的魅力就在于精确而直观地向我们展示了生物体的骨骼解构与位置犹如X光片一样,并且还是立体的,
也避免了传统的解剖取骨清洗再组装而导致的骨骼相对位置的改变,
同时通过染色将骨骼染成绚丽的颜色,使各种精细结构也展露无遗!
那个日本生物学家也给出了制作方法,但是太麻烦!所用试剂过多!没有一定条件要制作还真是很麻烦,而且有些试剂很贵的 = =(←这才是重点)
其实,透明骨骼染色标本的制作没有那么复杂!特别是小型动物,只用一些基础的试剂就可以制作出非常美丽的标本~!
这些艺术品可以用来当摆件,也可以收藏~而且~我发现很多妹子都超喜欢这样的小礼品,哪怕她是文科生~~(嘿嘿,下面的还用我教你?)
好啦,废话不多说~下面lz我就把我制作标本的过程一步步的发上来!手把手教你做~!
---------------------------------------------------------------我是废话和正题间分割线 = =----------------------------------------------------------------------------------------------
首先当然是试剂准备啦!(我相信在一个常年混KC的KCer的实验室里以下试剂都是常备~):

蒸馏水(整个制作过程最好都用蒸馏水,制作效果最好!没有?屈臣氏提一桶去~)
95%乙醇
甘油
脂溶性溶剂
氢氧化钾KOH
3%过氧化氢H2O2
茜素红S(万能的TB,25g,18左右)
麝香草酚(万能的TB,25g,18左右)

仪器物品:

制作标本时的反应容器,要能加盖密封
镊子一把
小号注射器一根
承装标本的容器,各种漂亮的玻璃瓶都成~!

接下来是动物体的选择:
尽量采用完整无伤的动物体制作(当然专门制作特殊病理形态除外),不一定要鲜活动物体,甚至不新鲜的尸体都可以,只要骨骼完整。动物体不要过大,体长3~5cm就好,大的可以6~8cm,最好不超过10cm,否则透明效果不好。注意幼年期的动物,骨骼很多还是软骨,染不上色的!(顺便说一句茜素红S是和钙盐结合而染色,所以只有成熟骨组织才能上色)

然后,为了后面制作方便,先配置以下试剂,单独存放,随用随取:
预透明剂:2%KOH水溶液(要多配点,分作以下试剂基础)
染色剂:将茜素红S配制成95%乙醇饱和溶液(溶解度很低但颜色很深,不要加太多染料),将此饱和溶液加入9倍体积1%KOH水溶液内(稀释10倍)
脱色剂:将30%H2O2稀释至3%
透明脱色剂:1%KOH的20%甘油水溶液(将2%KOH,纯甘油,蒸馏水按5:2:3体积混合)
梯度透明剂:50%甘油水溶液,纯甘油

下面就开始制作啦!(这里用两条鱼做演示)
动物体处死与处理:
鱼类用40度温水处死,不能用开水,处死后在流水中刮去身侧大部分鳞片,不求刮干净,不剖腹,不去皮。
其他动物可采用窒息的方式处死,处死后剥皮,尽量去尽皮下脂肪,剖腹取尽内脏,注意不要伤及肋骨,冲洗干净

固定:
将处理好的动物用95%乙醇固定,不用整姿,液体量要没过标本(下同,液量均需没过标本),24小时后换新乙醇一次。换乙醇后固定一周以上时间。
鱼类可以在换液的时候顺便剥皮,这时候鱼皮被乙醇固定发硬,可以整块撕下,要不后期剥皮很麻烦!3cm以下的鱼就不用剥皮了
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鱼肉鱼鳍都变成白色了,仔细看的话因为95乙醇强烈的脱水作用,还有皱纹 = =

脱脂:
这一步是可选步骤!如果动物体比较大(5cm或以上)或者是肉食性鱼类则需要脱脂,将固定动物的乙醇倒出来另放,用脂溶性溶剂浸泡脱脂48小时以上(可以用丙酮、乙醚、乙酸乙酯等等都可以!只要和高浓度乙醇混溶就可以~如果这些不好找的话,还有一个便宜量又足的选择——香蕉水!随便一个五金铺子三五块就买到一大瓶!),48小时以后倒掉溶剂,把乙醇倒回去浸泡一天以彻底去除溶剂。

脱醇复水:
倒掉乙醇,倒入蒸馏水将标本浸泡至残余乙醇完全溶出标本沉底为止,其间不时摇晃容器并换水1~2次,最后一次换水以后泡一晚上。
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标本因为富含酒精而浮起来,要一直泡到沉下去为止!

预透明:
倒掉蒸馏水,倒入2%KOH溶液预透明,要随时观察,当标本整体变为半透明以后后再过一小时左右容器底部会有有少量血水流出,此即标志透明时间合适。(大约4小时左右),过度透明的话会散架的。。。。
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对比明显,KOH一倒进去薄弱的地方立刻变得透明起来~然后逐渐向厚的地方扩展~
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透明到这种透明程度(对着光看)以及底部有黄色血水流出就说明时间够了
同时因为碱的作用,鱼鳍会尽数展开,所以前面不用担心鱼鳍缩起来
要注意的是透明以后标本整体已经非常柔软易碎,此后所有步骤必须避免直接接触标本,小心操作!换液也要快而且轻,尽量保证标本一直处于液体环境中,因为它已经软来撑不起自己的体重了。。。。

染色:
倒掉KOH溶液,倒入染色液,染色时间冬天48~72小时,夏天24~48小时。
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黄色的茜素红酒精溶液一加入KOH立刻变成深紫红色,随pH而变色~

脱浮色:
染液可以重复用的,用蒸馏水洗去标本表面浮色,并用蒸馏水浸泡标本直到无浮色溶出标本肌肉呈淡粉色为止(约两天),看着颜色深了就换水。
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刚开始用水洗的时候隔一会儿浮色就把水染的很深,所以要勤换水
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一直要泡到像这样没有浮色了才可以!

脱色:
倒掉蒸馏水后,倒入3%H2O2脱色,脱色时会产生大量气泡使标本浮起。脱色时间以标本软组织完全脱去颜色,以及身体上的黑色部位(如眼睛、鱼鳍等)全部变为黄褐色为准,越长越好。
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标本里面会产生很多泡泡,所以浮起来成这样一个奇葩姿势,不过在这里我发现一个不同,那条小鲶鱼是尸体制作的,从始至终基本上就没有泡泡!
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这是一组对比,上面的鰟鮍没有用H2O2脱色,直接进入下一步,可以看到肌肉的颜色完全脱掉了,但整个头部,特别是眼睛,色素沉积还是非常严重,显得黑黑的,鱼皮也有点泛黄
而下面的食蚊鱼用H2O2脱色后好很多,眼睛自身的黑色素也给脱去了,鱼皮也没有颜色,整个要清新、干净得多。

精处理:
在脱色后将标本连带双氧水倒入培养皿里,如果是小鱼前面没有剥皮的话,此时鳞片亦被染成红色,很容易就去除没有刮干净的鳞片,标本体内生成的气泡用小注射器穿刺吸出来,吸掉大的气泡就可以了,小的不用管。处理后小心地将标本放回容器,用蒸馏水浸泡过夜除尽双氧水。
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一定要连水一起倒出来,标本很脆弱的这时候!去鳞很好去,都不用刀,镊子尖轻轻一刮就好了
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LZ就是前面没有剥皮,这会儿剥皮麻烦死了!标本已经软得根果冻一样!完全没有着力点!

再脱色与透明:
倒掉蒸馏水,倒入20%甘油透明脱色剂进一步与脱色与透明,倒入后因为密度差异,标本会浮起来,先平置容器15分钟待标本沉下后再恢复直立。透明时间为一周左右,待软组织浮色去尽,黑色部分(眼睛)由黄褐色变为透明或浅黄色后即可。大概要一周左右!这个透明剂里也有KOH!时间太长也会散架的哦!而且,标本体内的小气泡会在此步中缓慢溶解掉,最后全部消失。
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先横放一会儿,要不然标本浮起来会折起来的,放个10来分钟就沉下去了
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这里是lz血的教训啊!!![s:441] lz嫌大鱼透明得慢就给它水浴加热了一下!!结果!不到半小时整体散架了!!![s:441] 再次深切提醒心急吃不了热豆腐[s:441]
不加热的放一周多都没问题的!而且越来越透明!

梯度透明
倒掉20%甘油,倒入50%甘油(不含KOH),透明约一周左右,再用纯甘油彻底透明,一周以上。这一步要注意:50%及以上浓度甘油粘稠,对流不易,要不时振摇容器使标本中的低浓度甘油彻底溶出。同时气泡在甘油里面不会溶解,所以这一步一定要小心不要代入气泡。
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同样每次换高浓度后要平躺一会儿~刚放进去因为密度差异,还看得到透明的肉~
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慢慢甘油渗进去以后就会变得很透明了~
怎么样,已经有那么一回事了吧~?

最后就是装瓶啦~
用新的纯甘油把标本浸泡在选好的标本瓶里密封,放一粒麝香草酚晶体防腐就大功告成了~(晶体会慢慢溶解掉)
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这样就大功告成了!(还可以看到那一粒麝香草酚晶体~)
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头部
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身体
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尾鳍
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胸鳍以及小得不能再小的腹鳍~(鲶鱼从肚子一直连到尾巴的是臀鳍)
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鲶鱼背鳍已经退化,只在脊椎骨那里有一点点背鳍骨的残迹~

=============分割线========================
下面是楼主做的其他的一些成品~也发上来给大家看看~~~
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一只胖头鱼的鱼苗~
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鰟鮍
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食蚊鱼(平时拿来作饲料鱼的)

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胖头鱼和鰟鮍都是鲤科鱼类~鲤科鱼类每个肌节间都有Y形肌间刺,没错就是张爱玲“一恨鲫鱼多刺”的刺,这个用一般方法可是真不好显示啊~~~
中过招的童鞋自己举手~

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鲤形目和鲇形目的最前面1-3枚脊椎骨的某些成分会变异形成一组具有特定功能骨片,叫做韦伯氏器。
其实就是连接鱼鳔和内耳的听骨链,这样鱼鳔感受到的震动可以传达到内耳形成听力!增强感知范围!

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食蚊鱼属鳉科,每根肋骨上都有个小岔~

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没想到1、2cm长的吃杂物的食蚊鱼也是有“牙齿”的!

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蛙类也有“牙齿”

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蛙“手”。。

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最后来一张展示全家福~

总结:
其实透明骨骼标本的制作一点都不难,试剂也好找,虽说总体做下来要耗费大概一个月左右,但其实其中大部分时间都是在等它自己反应而已。
我们只要算好天数去换个液或者摇一下就是了,一点也不费事。而且!可以同时做!一做就是一批!只要提前把试剂配好,一批一批的做都可以大量产出了。。。就是比较费酒精,不过我相信这也不是个问题。。。
最后呢就是想说楼主这个方法和那个日本科学家的方法不冲突,楼主的方法比较适合小型鱼,简单方便,而大型鱼还是要靠日本的方法,要用胰蛋白酶消化掉大量的肌肉,而且做出来还没有小鱼这么晶莹剔透。
同时日本方法还加了 阿利新蓝 这个是软骨染色剂,可以把软骨染成蓝色,而硬骨是红色更漂亮,特别是对于软骨鱼类和幼体动物(鲨鱼,鳐鱼之类的),骨骼都是软骨,非要阿利新蓝才能上色! 但唯一的缺点就是阿利新蓝好贵的。。。一克就要一两百。。。楼主没米所以就不用了。。。。这样已经很好了不是吗~?
想要用的童鞋在标本固定好以后复水之前用阿利新蓝酒精溶液泡一天就可以了,其他步骤完全一样。
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来自 快乐DIY
 
3
2014-12-10 23:56:00
100楼
好复杂,好锻炼(zhé mó)人。
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2014-12-12 21:15:24
zxyso4(作者)
101楼
引用 凤凰院hark:
问个问题,像青蛙这样的动物也可以直接按这个流程做么?还是需要别的处理方法
一样的啊,我里面不是有么
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2014-12-24 23:36:09
2014-12-24 23:36:09
102楼
问个问题,鱼类的内脏需要去除么?
需要的话在哪一步进行??
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2014-12-26 16:23:12
2014-12-26 16:23:12
zxyso4(作者)
103楼
引用 凤凰院hark:
问个问题,鱼类的内脏需要去除么?
需要的话在哪一步进行??
小鱼可以不去,大鱼最好在初步脱色后精修除鳞那部去除,一开始就去除的话初透明阶段肌肉膨胀腹腔没有压力的话会把脊柱压弯
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2014-12-28 03:26:52
2014-12-28 03:26:52
104楼
真牛
LZ敢不敢把自己做成标本?泡KOH澡。。。(开个玩笑)[s::lol]
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105楼
lz我又来问问题了,在放入20%甘油的那一步,我放了一天以后观察发现标本体内多出很多气泡。。。

还有为什么在20%甘油里面放了一两天还没沉下去???
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2015-01-01 20:56:45
2015-1-1 20:56:45
zxyso4(作者)
106楼
引用 Fallen:
真牛
LZ敢不敢把自己做成标本?泡KOH澡。。。(开个玩笑)
你可以试试先~
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zxyso4(作者)
107楼
引用 凤凰院hark:
lz我又来问问题了,在放入20%甘油的那一步,我放了一天以后观察发现标本体内多出很多气泡。。。

还有为什么在20%甘油里面放了一两天还没沉下去???
所以放进去之前要把气泡抽一下。。。
不过没关系,我发现小气泡会逐渐溶解掉,不过时间要很久
沉不下去估计就是因为气泡了
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108楼
引用 zxyso4:
所以放进去之前要把气泡抽一下。。。
不过没关系,我发现小气泡会逐渐溶解掉,不过时间要很久
沉不下去估计就是因为气泡了
气泡我能抽的都抽了,但是原本是内脏的位置抽不掉,抽点气然后又有气泡进去了

现在小的一条透明度没问题了,但是比较大的一条透明度一直不行。20%甘油泡了3天了还是没到小鱼1天的透明程度,靠近骨骼的肌肉还是有点浑浊和带有颜色
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2015-01-03 20:04:16
2015-1-3 20:04:16
zxyso4(作者)
109楼
引用 凤凰院hark:
气泡我能抽的都抽了,但是原本是内脏的位置抽不掉,抽点气然后又有气泡进去了

现在小的一条透明度没问题了,但是比较大的一条透明度一直不行。20%甘油泡了3天了还是没到小鱼1天的透明程度,靠近骨骼的肌肉还是有点浑浊和带有颜色
这个。。。你也发现抽内脏的气泡是个技术活了是吧 = = 因为透明了肚子里啥是啥根本不知道,有时候看着在旁边就是抽不到 = =,这个只能耐心用小注射器一点点穿然后抽 = =
实在抽不出来算了,泡个一两周自己就溶解了 = =

大鱼有这个问题,因为甘油渗透力不强,所以要泡很久,还有一种可能那一部分是脂肪,脂肪是不会透明的。。。不过你都做到这一步了是脂肪也没办法了
下次做大鱼的时候酒精固定一周以后换到香蕉水(五金店有)里泡一周,再用酒精泡两天把香蕉水去除就能很好的脱脂
都透明了千万别返回去用酒精或者香蕉水泡啊,标本会直接炸裂的
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110楼
引用 zxyso4:
这个。。。你也发现抽内脏的气泡是个技术活了是吧 = = 因为透明了肚子里啥是啥根本不知道,有时候看着在旁边就是抽不到 = =,这个只能耐心用小注射器一点点穿然后抽 = =
实在抽不出来算了,泡个一两周自己就溶解了 = =

大鱼有这个问题...
多谢回复,下次做大鱼的时候我有丙酮可以用。我看步骤的时候以为大鱼指的是那种十厘米以上那种大小的所以做的时候就没脱脂。顺带小鱼剥皮的时候因为腹部的肌肉太少直接连着腹鳍扒拉下来了,简直蛋疼,是浸过过氧化氢中之后剥的皮(之前一条小鱼是乙醇固定完剥的也一不小心把腹鳍带掉了
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2015-01-08 20:37:13
2015-1-8 20:37:13
111楼
没用的试剂倒下水道吗?我们这直排的,化学老不肯说。。。没有最实惠的做法吗?哪怕不染色,去宝宝那买太麻烦,而且不知道这些试剂的安全性,总觉得很危险,还有请问做晶体时,没用的溶液可以倒在家里的下水道吗?
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2015-01-10 18:12:38
2015-1-10 18:12:38
112楼
引用 小氚:
妹子会喜欢么…
这个不知道,不过只看得见骨骼的妹子我是不喜欢的,就算她是粉红色的也不喜欢。
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2015-01-11 14:40:25
113楼

标本里面会产生很多泡泡,所以浮起来成这样
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2015-01-12 10:26:57
zxyso4(作者)
114楼
引用 凤凰院hark:
多谢回复,下次做大鱼的时候我有丙酮可以用。我看步骤的时候以为大鱼指的是那种十厘米以上那种大小的所以做的时候就没脱脂。顺带小鱼剥皮的时候因为腹部的肌肉太少直接连着腹鳍扒拉下来了,简直蛋疼,是浸过过氧化氢中之后剥的皮(之前一条小鱼是乙醇固定完剥...
丙酮的话脱脂效果一般,撕皮还是固定了就撕比较好,漂白了再撕简直蛋疼,
撕到腹鳍旁边要小心,一般垂直鳍条方向撕会好些,爬撕掉鱼鳍就用刀片在鱼鳍根部划一下
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2015-01-16 05:24:20
2015-1-16 05:24:20
115楼
HI,樓主您好,有幾個問題想請教您,1、阿利新藍染液的配置方法為何?我這邊配置方式是:阿利新藍10mg配20ml冰醋酸加80ml的95%酒精,但染色下來的結果是魚鰭似乎被酸解,導致後續茜素紅無法染上魚鰭2、按照您的方式小魚不扒皮,並依序處理下去,但在茜素紅染色這步驟時,會發生魚體漲破的現象,尤其好發在背鰭、臀鰭這兩處,是否KOH濃度需下修?
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zxyso4(作者)
116楼
引用 caesarhsieh:
HI,樓主您好,有幾個問題想請教您,1、阿利新藍染液的配置方法為何?我這邊配置方式是:阿利新藍10mg配20ml冰醋酸加80ml的95%酒精,但染色下來的結果是魚鰭似乎被酸解,導致後續茜素紅無法染上魚鰭2、按照您的方式小魚不扒皮,並依序處理...
阿利新兰直接用乙醇溶解就可以了,不加醋酸,醋酸会溶解骨骼里的钙,而茜素红就是染钙质的,所以不能加酸
第二嘛,你要精细的话可以在乙醇固定以后就去皮,不去皮的话会有点破,但只要没伤到骨骼鱼肉透明了就看不出来了对吧 = =
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2015-01-17 19:56:11
117楼
有没有其他颜色又不贵的
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118楼
引用 zxyso4:
阿利新兰直接用乙醇溶解就可以了,不加醋酸,醋酸会溶解骨骼里的钙,而茜素红就是染钙质的,所以不能加酸
第二嘛,你要精细的话可以在乙醇固定以后就去皮,不去皮的话会有点破,但只要没伤到骨骼鱼肉透明了就看不出来了对吧 = =
我想也應該是被酸給酸解了,整個做下來,有加酸的阿利新藍泡出來的標本,整個軟趴趴的,希望後面在純甘油裡面不會這樣就好,目前正在測試您說的用酒精溶解,後續再看狀況如何。
另外就是測試將KOH濃度降低一半,希望不會再度爆破,因為前一批有剝皮的,在背部肌肉有爆破現象,造成背鰭擠壓在一起,一整個看起來就是怪...
還有就是,方法應用在鹹水魚上,泡2%KOH的透明狀況比起淡水魚來說,似乎不是很理想,現在有一尾小丑魚已經泡了將近3小時,但肌肉透明程度比不上羅非魚,相同長度的羅非魚在10幾分鐘內就透明到可以清晰見到骨骼了,泡3個小時的小丑魚卻得照光才勉強可見骨骼,真不知該繼續泡下去還是該收手...
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2015-01-20 02:52:23
2015-1-20 02:52:23
119楼
很漂亮[s::victory:]
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120楼
好厉害!涨知识了!
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2015-01-22 10:47:02
2015-1-22 10:47:02
zxyso4(作者)
121楼
引用 caesarhsieh:
我想也應該是被酸給酸解了,整個做下來,有加酸的阿利新藍泡出來的標本,整個軟趴趴的,希望後面在純甘油裡面不會這樣就好,目前正在測試您說的用酒精溶解,後續再看狀況如何。
另外就是測試將KOH濃度降低一半,希望不會再度爆破,因為前一批有剝皮的,在...
降低的话透明效果如何需要实验,我是觉得如果爆破不影响骨骼的话就可以不管他
在甘油里面以后因为脱水硬度会上来一些
咸淡水鱼的话我猜测有可能小丑鱼脂肪含量更高,而这种方法是无法使脂肪透明的,要在之前用溶剂把脂肪溶解掉
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zxyso4(作者)
122楼
引用 shownion:
有没有其他颜色又不贵的
茜素就这个颜色
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2015-01-27 12:05:19
2015-1-27 12:05:19
123楼
感觉不错,等哪天试试
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2015-01-31 12:52:32
2015-1-31 12:52:32
124楼
乌龟或者鳖要怎么做啊?想不到怎么样能剥皮去内脏
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2015-02-08 16:39:21
2015-2-8 16:39:21
zxyso4(作者)
125楼
引用 凤凰院hark:
乌龟或者鳖要怎么做啊?想不到怎么样能剥皮去内脏
龟鳖从颈部下方及尾部下方切口,用镊子取出内脏
特别是鳖,背甲上还有一层皮肤,要去掉
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126楼
神人 膜拜
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127楼
引用 zxyso4:
龟鳖从颈部下方及尾部下方切口,用镊子取出内脏
特别是鳖,背甲上还有一层皮肤,要去掉
这貌似有点技术含量、、、
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2015-02-09 13:13:06
zxyso4(作者)
128楼
引用 凤凰院hark:
这貌似有点技术含量、、、
耐心点慢慢来咯
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129楼
引用 zxyso4:
耐心点慢慢来咯
于是我刚才试了一下。手这么一用力把锁骨还是啥的直接分离了。于是现在胸骨那一块是挂在本体上的。。。背甲上的皮根本剥不掉,只能用刀片刮
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zxyso4(作者)
130楼
引用 凤凰院hark:
于是我刚才试了一下。手这么一用力把锁骨还是啥的直接分离了。于是现在胸骨那一块是挂在本体上的。。。背甲上的皮根本剥不掉,只能用刀片刮
要小心啊,可以先去百度下龟的骨骼再来,避免下错手~
你是龟还是鳖?龟的话没有皮肤,鳖的你可以等泡过减之后再剥会好一些
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131楼
引用 zxyso4:
要小心啊,可以先去百度下龟的骨骼再来,避免下错手~
你是龟还是鳖?龟的话没有皮肤,鳖的你可以等泡过减之后再剥会好一些
鳖。。。我只看过乌龟的骨骼,鳖的不确定哪些地方是皮哪些是骨骼的
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132楼
引用 zxyso4:
要小心啊,可以先去百度下龟的骨骼再来,避免下错手~
你是龟还是鳖?龟的话没有皮肤,鳖的你可以等泡过减之后再剥会好一些
鳖的话是泡过KOH然后同时把内脏和皮肤都去除?还是说先在乙醇浸泡之前去了内脏,然后到泡完KOH再去皮?
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133楼
引用 zxyso4:
降低的话透明效果如何需要实验,我是觉得如果爆破不影响骨骼的话就可以不管他
在甘油里面以后因为脱水硬度会上来一些
咸淡水鱼的话我猜测有可能小丑鱼脂肪含量更高,而这种方法是无法使脂肪透明的,要在之前用溶剂把脂肪溶解掉
1% KOH的透明度測試是OK的,0.5%KOH經測試也沒問題,只是浸泡時間要比較長一些。
第一,鹹水魚類透明時間是真的得拉長,除了小丑魚之外,還測試火背仙、黃尾仙、火焰仙等,浸泡2%KOH的時間都得拉長將近一個星期才能到達羅非魚的透明狀態,測試的這三種鹹水魚都是拒食餓死的,拒食時間都超過一個月,因此應該沒有脂肪,推測可能是鹹、淡水魚的體蛋白組成不同導致這樣的結果。
第二,泡阿利新藍酒精溶液有個缺點,那就是肌肉會染上顏色,後續不管怎樣泡3% H2O2,都無法褪色,反倒是加酸的阿利新藍溶液沒這問題,只是鰭條末端都酸解了染不上茜素紅。
第三,不剝皮測試2cm以下魚隻,阿利新藍、茜素紅染色必須浸泡雙倍時間,不然體內骨骼無法染上顏色,但泡阿利新藍酸溶液兩天,魚鰭幾乎都無法染上茜素紅,所以還是剝皮比較好些。
第四,爆破情況開始蔓延,連跟著樓主步驟製作也會發生肌肉爆破,這情形尤其會發生在大帆茉莉、小艴幧砩希瑢嵲谑遣恢?绬栴}在哪裡。
第五,改變一個步驟測試羅非魚、大帆茉莉,用一半的95%酒精加一半的24%福馬林固定三天,然後浸泡2%KOH,目前已經將近1個月身體都還沒透明,僅有肚子部分透明,正在考慮購買蛋白脢來添加。
第六,測試NaOH取代KOH,目前貌似可以,但還在測試。
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2015-02-10 15:12:21
zxyso4(作者)
134楼
引用 凤凰院hark:
鳖的话是泡过KOH然后同时把内脏和皮肤都去除?还是说先在乙醇浸泡之前去了内脏,然后到泡完KOH再去皮?
你可以吧能去的都去了先。。。
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zxyso4(作者)
135楼
引用 caesarhsieh:
1% KOH的透明度測試是OK的,0.5%KOH經測試也沒問題,只是浸泡時間要比較長一些。
第一,鹹水魚類透明時間是真的得拉長,除了小丑魚之外,還測試火背仙、黃尾仙、火焰仙等,浸泡2%KOH的時間都得拉長將近一個星期才能到達羅非魚的透明狀態...
碱的浓度变动可以比较大,但相应的时间要掌握好,这个尝试好就可以了
泡的时间可能跟温度有关系,温度、浓度、时间三者之间掌握好,只要不散架了就可以

不管是不是饿死都建议脱脂。。。

阿利新蓝我没试过,不过按照我做结晶紫染色的经验可以用酒精溶液染色以后用酸酒精脱肌肉的颜色,酸酒精100ml95乙醇加冰醋酸2滴,2滴就可以了,足够脱色了,而且不会出现你遇到的腐蚀问题

建议剥皮,要不最后做出来也会有鬼影。。。

爆破确实有,碱液进去以后肌肉膨胀,所以肉厚的地方可能会爆,也别是比较“粗短”的鱼类可以预先用刀划小切口或者针扎缓解,不过我一般是只要不影响骨骼懒得管它。。。

不用福尔马林,因为福尔马林固定的标本很难透明

NaOH碱度和透明度不够,你看透明皂都是KOH生产的。。。。
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2015-02-11 14:13:03
136楼
引用 zxyso4:
呼~沙发必须自己坐~!打了好久终于打完了~!
祝大家都能做出满意的标本!
有任何问题欢迎讨论~!
可以用无水乙醇么还是要用95的?无水会不会脱水严重?
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2015-02-12 00:04:57
137楼
引用 zxyso4:
碱的浓度变动可以比较大,但相应的时间要掌握好,这个尝试好就可以了
泡的时间可能跟温度有关系,温度、浓度、时间三者之间掌握好,只要不散架了就可以

不管是不是饿死都建议脱脂。。。

阿利新蓝我没试过,不过按照我做结晶紫染色的经验可以用酒精溶液...
這次出了點小狀況,昨夜吃尾牙喝了酒,所以昨晚忘記先用2% KOH做預透明就將茜素紅溶液(含1% KOH)倒入,浸泡一天後,今晚發現魚肉也透明了(6cm左右的羅非魚),只是脊椎骨部分還未染上顏色,目前打算再泡個一天看看,也許後面可以跳過預透明這步驟,爆破現象看看是否可以改善或解決.
剛試了2% NaOH來做預透明,發現是可行的,但是透明時間拉長許多,目前丟入茜素紅溶液(含1% KOH) ,待泡一天後再看狀況如何.
另外發現一件事情,回顧我大學時期所學到的方法,發現在阿利新藍(含冰醋酸)浸泡後,舊有方法會跟著泡梯度酒精覆水,也有使用硼酸鈉進行中和酸的步驟,所以這次跟著做了點測試,阿利新藍(含冰醋酸)浸泡後浸泡RO水兩次各半個小時,然後直接進入NaOH 2%預透明,發現魚鳍侵蝕軟化的現象有所改善,現就等明晚看茜素紅染色結果,後續會進行泡完阿利新藍後直接轉入KOH這步驟.
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2015-02-13 14:22:13
2015-2-13 14:22:13
zxyso4(作者)
138楼
引用 俗世怂人:
可以用无水乙醇么还是要用95的?无水会不会脱水严重?
95的就可以了,无水脱水很厉害
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zxyso4(作者)
139楼
引用 caesarhsieh:
這次出了點小狀況,昨夜吃尾牙喝了酒,所以昨晚忘記先用2% KOH做預透明就將茜素紅溶液(含1% KOH)倒入,浸泡一天後,今晚發現魚肉也透明了(6cm左右的羅非魚),只是脊椎骨部分還未染上顏色,目前打算再泡個一天看看,也許後面可以跳過預透明...
预透明可以加速染液渗透

你可以把阿利新蓝里的醋酸浓度降低些,然后后续要容易得多
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140楼
引用 zxyso4:
95的就可以了,无水脱水很厉害
我只有无水。。。。无水可以使第一步固定时间变短么?
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141楼
引用 zxyso4:
95的就可以了,无水脱水很厉害
那些小鱼这次特地在老家看看也没有。。。。只有大鱼。请问在哪可以买到比较多的小鱼呢?
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142楼
可用75的酒精么…买不到95的酒精(; ̄Д ̄)
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2015-02-14 23:33:05
2015-2-14 23:33:05
143楼
引用 俗世怂人:
我只有无水。。。。无水可以使第一步固定时间变短么?
無水的酒精可以加蒸餾水來稀釋成95%,沒記錯的話無水酒精應該是99.5%~99.8%,算他是100%的酒精好了,每1公升的無水酒精加入50 毫升的蒸餾水就成了95%酒精,當然如果要更精準一點的話,就得看你的酒精濃度來做計算了。
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144楼
引用 俗世怂人:
那些小鱼这次特地在老家看看也没有。。。。只有大鱼。请问在哪可以买到比较多的小鱼呢?
可以找一下一種名為朱文宓男◆~,這於通常的是買來餵大魚的,觀賞水族的店應該都會有賣。
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145楼
引用 zxyso4:
预透明可以加速染液渗透

你可以把阿利新蓝里的醋酸浓度降低些,然后后续要容易得多
有在打算降低一半,只是後續還要實驗一下。
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146楼
引用 LLLLeo:
可用75的酒精么…买不到95的酒精(; ̄Д ̄)
淘寶有賣...
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2015-02-15 12:28:01
147楼
快递停了(; ̄Д ̄)
准备做来送朋友的…
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148楼
不知道为啥 杀鱼下得去手 但是做标本下不去手哎、 不过这标本确实漂亮 要是加上荧光粉就更好看了
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2015-02-17 19:26:41
2015-2-17 19:26:41
149楼
引用 caesarhsieh:
可以找一下一種名為朱文宓男◆~,這於通常的是買來餵大魚的,觀賞水族的店應該都會有賣。
不知道楼主知不知道仓鱼,就是细细长长的大概食指那么粗但是很长,50ml离心管勉强装下,请问我该把这种鱼当小鱼对待还是大鱼对待。要不要去皮脱脂?。。。另外酒精泡完皮和肉都黏一起了,如果不去皮。KOH可以使鱼完全透明么?
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